小腸絨毛細胞的問題，透過圖書和論文來找解法和答案更準確安心。 我們找到下列問答集和懶人包總整理

探討膽酸轉運蛋白ASBTNM電梯式移動的受質運輸機制

為了解決小腸絨毛細胞的問題，作者呂佩樺 這樣論述：

膽酸是使用血漿膽固醇作為前驅物在肝細胞中所合成的兩親性固醇。膽酸平時存在膽囊中，當人體進食時，膽酸會被分泌到小腸，幫助乳化脂類物質。脂質消化後，大多數膽酸不會隨消化道排出，90%的膽酸反而是透過小腸細胞被重新再吸收，然後通過肝細胞的基底外側膜滲透，通過腸肝循環進入肝臟。膽酸再吸收的過程需要有很多的穿膜轉運蛋白質參與。ASBT(Apical Sodium-dependent Bile acid Transporter)是一個位在小腸絨毛細胞上的一個二級主動轉運蛋白，利用鈉離子濃度梯度將腸道中的牛磺膽酸(taurocholate, TCH)轉運到小腸表皮細胞內。過去的研究已經解出ASBT細菌同源

蛋白的三種不同晶體結構，第一個結構是ASBTNM，在此結構中發現有2個鈉離子位於core domain中，牛磺膽酸(TCH)則位於向內開的空腔中。其他的兩個結構是ASBTYf及ASBTYf E254A，分別解出向內開和向外開的構型，但在這兩個結構裡都沒有發現到任何鈉離子與牛磺膽酸的存在。將這三個晶體結構進行構型比較，可以推測ASBT採用電梯式移動(Elevator-like movement)的受質運輸機制模型。但是，Na+和受質是如何導致構型改變的機制仍不清楚。因此在本研究中，我們利用凝膠內螢光定點烷基化(Site-Directed Alkylation monitor detected b

y in-gel Fluorescence)這項技術來檢測不同環境下ASBTNM受質結合口袋的溶劑可接觸性，其結果提供了ASBTNM在不同環境下構型改變的動態資訊。另外，我們突變ASBTNM上的Y39和T303成為cysteine，並且自旋標定(spin-label)了這兩個cysteine位置以進行EPR光譜學的方法與DEER量測這兩個氨基酸的距離分佈。結果發現在鈉離子的存在下，ASBTNM會將構型轉移到向內狀態；相反，在缺鈉離子及TCH條件下，向外開的ASBTNM數量明顯較多。在Na+和TCH結合後，ASBTNM構型也是向內開的狀態。有趣的是，在沒有Na+的TCH結合下，ASBT的受質結合

口袋對外部環境更開放，這進一步說明Na+離子是促使構型向內狀態的關鍵因素。此外，我們用化學交聯的方法證實ASBTNM主要會形成單體來進行電梯式移動。本研究使用生化和生物物理方法進行的動力學研究補充了ASBT晶體結構所提供的靜態信息，同時也說明ASBT的Na+依賴性構型動力。

葉黃素保護氨甲蝶呤誘發小腸表皮細胞氧化性傷害之機制研究

為了解決小腸絨毛細胞的問題，作者張繼仁 這樣論述：

氨甲蝶呤 (Methotrexate, MTX)為葉酸拮抗劑，主要抑制細胞中二氫葉酸還原酶 (dihydrofolate reductase, DHFR)將二氫葉酸還原成可轉換成許多輔酶之四氫葉酸 (tetrahydrofolate)。因其結構與葉酸相似，故可與葉酸競爭同一酵素抑制核酸形成，影響體內細胞增生 (proliferation)，特別是增生快速的細胞，例如癌細胞、骨髓細胞與皮膚細胞。MTX為一標準抗腫瘤化療藥物，用於乳癌、頭頸癌、膀胱癌、血癌、淋巴癌、骨癌與肺癌等。MTX也被用來治療皮膚癬與類風濕關節炎等自體免疫疾病。使用MTX常造成許多副作用，包括噁心、疲累、因免疫系統抑制而伴隨

的感染風險、白血球數降低、口腔表皮黏膜破損等。MTX也常造成腸胃道副作用，尤其是在高劑量投藥時更為明顯。已有研究指出，MTX會損害小腸表皮黏膜細胞，造成營養分吸收不良與腹瀉。而MTX所造成的小腸損傷主要是因為過氧化基 (Reactive oxygen species, ROS)的產生。因此，已有許多抗發炎、抗氧化、抗增生或調節免疫作用的藥物被開發來降低MTX毒性的研究；但是仍未發現任何一種藥物能有效的保護正常細胞不被MTX所傷害。葉黃素 (Lutein)為天然合成的類胡蘿蔔色素，能有效吸收藍光並被證實能預防老化相關的眼睛黃斑部病變 (Age-related macular degenerati

on, AMD)。因此，lutein被認為是能夠增進視力並降低光傷害的營養保健品。Lutein也在細胞實驗中被證實能清除過氧自由基、氫氧自由基及抑制脂質氧化作用。在小鼠動物模式結果顯示，口服lutein的小鼠，其血液及肝臟中的過氧化氫酶 (catalase, CAT)、超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase, SOD)、穀胱甘肽還原酶(glutathione reductase, GR)之活性以及穀胱甘肽有增加的趨勢；而在肝臟中，則促進穀胱甘肽過氧化物酶 (glutathione peroxidase, GPx)及穀胱甘肽轉移酶 (glutathione S-transfe

rase, GST)之活性。由於lutein的抗氧化特性，其有可能降低MTX或其他抗癌藥物所誘發的腸道副作用；因此本研究利用體外細胞實驗與小鼠動物模式研究lutein對於MTX或ROS所造成小腸細胞傷害的保護機制。結果顯示lutein能夠有效的抑制MTX在大鼠小腸細胞株IEC-6所誘發之ROS，進而抑制細胞凋亡的發生。經由lutein前處理，可以藉由提高抗氧化酵素例如SOD與CAT的表現進而抑制MTX產生之自由基。除此之外，lutein也可提高小腸表皮細胞內基礎細胞自噬作用來對抗氧化壓力。細胞自噬作用為細胞在受到營養物或其他代謝壓力時維持細胞恆定性之消化機制。結果顯示lutein處理可降低過氧

化氫造成的ROS產生，而提高細胞存活率。Lutein能有劑量依賴性的增加細胞自噬標誌蛋白，第二型微管相關蛋白輕鏈3蛋白 (microtubule-associated protein light chain 3-II, LC3-II)的產生與細胞質中LC3的累積。再藉由電子顯微鏡直接觀察細胞自噬體 (autophagosomes)的形成、細胞自噬相關基因的活化(包括ATG4A、ATG5、ATG7、ATG12及beclin-1 (BECN1))、以及BECN1/Bcl-2表現比例的增加，證實lutein在IEC-6細胞中促進細胞自噬作用。利用添加細胞自噬抑制劑bafilomycin A1，顯示l

utein誘發保護型細胞自噬作用。在機制面，lutein活化AMPK、JNK與p38訊息傳導途徑；但結果顯示這些訊息傳導與Lutein誘發之細胞自噬作用無關。利用慢病毒 (lentivirus)表現干擾RNA (shRNA)標靶BECN1表現，能有效抑制lutein誘發之細胞自噬，顯示lutein透過調控BECN1在小腸表皮細胞中啟動細胞自噬機制。更進一步，研究利用小鼠活體模式評估lutein保護MTX誘發之腸道細胞傷害。腹腔注射10-40 mg/kg MTX 對小鼠小腸絨毛細胞型態，造成劑量依存性與時間依存性之傷害。另一方面，將lutein溶於葵花油中給予小鼠口服40 mg/kg劑量連續8天

，並於第6天開始給予腹腔注射20與40 mg/kg MTX；結果顯示，lutein口服並注射MTX之小鼠其小腸絨毛長度與基底細胞之炎性浸潤 (inflammatory infiltration)與控制組無異，顯示口服lutein成功保護小腸表皮細胞對抗MTX之傷害。口服Lutein能增加在注射MTX小鼠小腸細胞中之抗氧化酵素，包括SOD, CAT, 和GPx的RNA與蛋白表現量，同時降低氧化指標髓過氧化物酶 (myeloperoxidase, MPO)與丙二醛 (malondialdehyde, MDA)。此外，本研究也第一次發現MTX抑制小腸細胞水通道蛋白(water channel pro

tein) 第三型與第四型Aquaporin (AQP-3 and AQP-4)之表現，此作用可以被lutein抑制。因而lutein還有可確保小腸細胞的水分吸收之益處。總結來說，本研究結果證明lutein能藉由調控增加抗氧化酵素表現與提高細胞自噬作用來保護MTX或ROS誘發之小腸細胞損傷；此研究顯示lutein可有效的作為誘發ROS之化療藥物的輔助用藥，避免此類藥物對小腸或其他正常組織的損傷。